乙肝表面抗原，也称为澳大利亚抗原，最早被发现至今已近60年，病毒性肝炎依然是肝硬化和肝细胞癌发病和死亡主要原因。现有一线批准药物包括干扰素α，聚乙二醇干扰素α、恩替卡韦（ETV）、富马酸替诺福韦酯（TDF）以及富马酸替诺福韦艾拉酚胺（TAF）。

其中，ETV/TDF/TAF均属于NAs，虽然NAs抑制病毒复制的转录后阶段，但它们并不以稳定持续存在的共价闭合环状DNA（cccDNA）作为靶点。因此，比如NAs这一类已授权上市抗病毒药物，在病毒学方向有局限性。cccDNA，这是乙肝病毒复制的中间体，它是在肝细胞的细胞核内形成的一个小染色体，并可能发生表观遗传修饰。

　　而乙肝病毒的X蛋白（HBx），它通过灭活染色体结构来维护复合体的组成部分，发挥cccDNA的稳定作用。cccDNA和宿主转录因子和病毒蛋白结合，使病毒基因表达和复制。与调节甲基化或异染色质形成的因素相关，也可能让cccDNA失活，并导致持续潜伏或隐匿的HBV感染。越来越多研究表明，乙肝病毒的逃逸突变进展或免疫缺陷，都可能导致HBV复制重新激活，因此，全球科研人员强调cccDNA特异性治疗药物开发是有必要的。

　　目前，乙肝领域大多数候选药物都是小分子药物，主要目的是在阻止HBV复制的不同阶段。新一代NAs的设计思路方向，主要是可以抑制病毒聚合酶，降低毒性，提高HBV的耐药屏障。其他正在开发的直接作用抗病毒药物包括HBV核心蛋白变构调节剂、HBV表面抗原（HBsAg）释放抑制剂和核酸聚合物，也可以抑制乙肝病毒进入。

　　随着全球科研人员发现了牛磺胆酸钠共转运多肽(NTCP)有助于HBV进入肝细胞，肽抑制剂比如Myrcludex-B也被开发用于单纯HBV或HBV/HDV共感临床试验。基因新疗法方向，上一期小番健康已经介绍了RNAi分子，虽然HBV治疗领域研发药物前景广阔，但目前还很少有直接能够禁用cccDNA的方法被开发出来。目前，最接近的方法是，序列特异性RNA引导核酸酶（RGN）和蛋白质的靶向诱变，这种方法已经引起人们兴趣。

　　因为这种方法可以通过永久地禁用cccDNA，从而治愈HBV感染（基因为基础靶向cccDNA新疗法）。HBV cccDNA是核酸酶基因编辑的主要候选基因，因其微染色体结构和有限序列具有可塑性。虽然病毒逆转录酶保真度较低，但紧凑的病毒基因组和重叠的阅读框，限制了逃逸突变体发展。病毒基因组内的插入和缺失，可能导致异常或截断蛋白，进而干扰病毒复制。

　　锌指蛋白(ZFs)是丰富的多功能哺乳动物蛋白，它作为转录因子自然发生。通过特异性靶向单个ZFs的核苷酸三联体，这些蛋白可以被设计成具有特定DNA结合特性的阵列。过往研究表明，抗HBV ZFNs首次在一个概念验证实验中被描述，其中36%的质粒来源的病毒序列，在病毒复制的细胞培养模型中被破坏。

　　与ZFNs一样，talen是一种核酸酶二聚体，由DNA结合蛋白与核酸内切酶结构域融合而成。转录激活因子样效应(TALE)来自于黄单胞菌，其个体重复结构域包含33-35个氨基酸，可识别单个碱基对。这些重复序列的核苷酸结合特异性由位于12和13位的重复可变双残基(RVDs)决定。在以往曾有科学动物实验表明，核酸酶的体内抗病毒作用，没有发现肝脏毒性，以及观察到血清乙肝表面抗原和环状病毒颗粒显著下降。